乙型肝炎病毒(HBV)五项血清学标志物是指HBV表面抗原(HBsAg)、HBV表面抗体(HBsAb)、HBV e抗原(HBeAg)、HBV e抗体(HBeAb)、HBV 核心抗体(HBcAb),也被称为“乙肝两对半”,其定性检测始于80年代中期,目前国内应用较多的是酶联免疫吸附测定法(ELISA)。虽然乙肝两对半定性检测对乙肝的疾病诊断、病程监测、疗效观察起到了一定的作用,但由于定性检测结果不是阳性就是阴性,无法动态观察患者病情的变化和疗效,所以,定性检测能为临床提供的信息有限,随着临床医学的迅速发展,定性检测逐渐不能满足临床及患者的要求。而在检验医学的发展下,乙肝两对半定量检测成为可行技术,大大弥补了ELISA定性检测的不足;同时,乙肝两对半的定量检测可与血清HBV DNA荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测相互补充,综合评价患者病情与治疗效果。

  定量检测的灵敏度提高

  Chemiflex化学发光免疫定量检测技术对于HBsAg的灵敏度可达0.1ng/ml,而ELISA定性检测则须当HBsAg含量达到2ng/ml才会呈阳性。

  1、急性乙肝早期: Chemiflex化学发光免疫定量检测技术能及早检出HBsAg,确切证实HBV感染。Chemiflex化学发光免疫定量检测技术的应用使HBsAg几乎能与HBV前S1蛋白(PreS1)同时检测,大大缩短了病程观察的“窗口期”时间;而在乙肝早期行ELISA定性检测,HBsAg往往呈阴性。

  2、慢性乙肝:一些患者由于缺乏对HBV包膜蛋白的免疫应答,HBsAg表达较低,因此,ELISA定性检测可出现HBsAg和HBsAb均为阴性的情况,而Chemiflex化学发光免疫定量检测则可避免这些情况的出现,为正确判断病情提供依据。

  3、HBV变异:HBV发生变异后,表达量常较低,常规ELISA可能测不出抗原,而Chemiflex化学发光免疫定量检测具有更高的灵敏度,可发现并同时检测出HBsAg和HBsAb。国内外研究表明,HBsAg的免疫应答与肝细胞损伤有一定关系;血清中HBsAg含量和患者对HBsAg的细胞免疫成负相关,而肝功能改变则与此种细胞免疫成正相关;故定量检测HBsAg也是反映这一关系的手段。

  4、低浓度携带者:对于一些特殊群体如医护工作者、患者家属等,他们长期密切接触乙肝患者,但只有少数人会直接感染成急性乙肝,多数人都是长期少量感染HBV,且对HBV有一定的免疫力,可能呈低浓度感染。感染科医生要对他们给予足够重视,密切关注并采取措施防止其发展成乙肝患者或慢性HBV携带者。

  动态观察疗效和监测病情

  疾病的发生、发展及预后是一个动态变化的过程,应用Chemiflex化学发光免疫定量检测法检测乙肝两对半中各项血清标志物的浓度变化,可对乙肝的病情发展、治疗、预后起到一个全程动态监测的作用,为医生对病情发展作出合理解释提供依据、指导治疗。

  1、定量分析HBsAg和HBsAb的浓度变化,预见急性乙肝是否处于恢复期。如HBsAg浓度降低,HBsAb的浓度逐渐升高,说明病情正往恢复期发展。而若HBsAg浓度处于较高水平或上升趋势,而HBsAb一直处于较低水平,则说明容易发展为慢性乙肝患者或HBV携带者。

  2、定量分析HBeAg和HBeAb的浓度变化,反映病情变化和治疗效果。定量检测能明确测定HBeAg向HBeAb转换的时期,即表现为HBeAg浓度下降和HBeAb浓度升高的过程。高浓度的HBeAg还可间接提示HBV处于高复制状态,具有较高的传染性;多数情况下,高浓度的HBeAb提示病情好转,而在某些时候(如肝功能指标很差)可能与肝坏死、肝硬化、肝癌有关。

  3、HBcAb浓度的高低可反映HBV感染的状态。高浓度的HBcAb提示HBV急性感染,低浓度的HBcAb一般为恢复期或既往感染。慢性乙肝呈HBcAb持续性高浓度。

  4、有利于判断慢性乙肝的活动性和非活动性。非活动性慢性乙肝患者的各项血清学指标都相对稳定,而活动性慢性乙肝患者往往呈进行性变化。

  5、可进行慢性乙肝的分类。根据HBV DNA前C基因突变的研究,可将慢性乙肝按HBeAg和HBeAb状况分为两大类。一是由野生型HBV感染引起的HBeAg阳性慢性乙肝,其疾病自然史可分为HBeAg阳性期和HBeAb阳性期。另一类型为HBeAb阳性慢性乙肝,主要由前C基因突变株HBV感染所致,也称异型慢性乙肝,在其疾病过程中始终检测不到HBeAg,但HBV DNA一直在进行性复制,HBsAg亦在高浓度处变动。HBeAb阳性慢性乙肝与HBeAg阳性慢性乙肝的转化期比较,乙肝两对半定性检测结果均为小三阳,但后者主要表现为高浓度HBsAg,忽高忽低的丙氨酸氨基转移酶(ALT)和HBV DNA始终阳性;这类患者往往对干扰素、拉米呋啶的治疗效果不佳。

  血清HBV DNA荧光定量PCR测定

  HBV DNA阴性并不完全代表患者体内的HBV已被清除,将血清HBV DNA荧光定量PCR测定结果结合乙肝两对半中各项血清学指标,更能客观反映患者体内HBV状态,正确判断预后及制定治疗方案。如果检测结果显示,HBV DNA阴性而HBsAg、HBeAg或HBeAb及HBcAb浓度均还较高,提示并未完全痊愈,HBV有可能再次出现复制状况,尚须密切关注。如果HBV DNA阴性而HBsAg、HBeAg或HBeAb及HBcAb浓度均很低或为阴性并持续一段时间,提示患者可能完全痊愈,预后良好。

  HBsAb定量测定指导乙肝预防

  HBsAb浓度在10mIU/ml以上的患者在行ELISA检测时, HbsAb可呈阳性,但并不表示机体一定具有免疫力。HBsAb浓度在10~100mIU/ml的患者,ELISA定性检测结果虽为阳性,但此时机体对HBV的免疫力较弱,甚至不能预防HBV感染;只有当HBsAb浓度达到100mIU/ml以上时,才可确定机体具有抵抗HBV感染的能力。

  HBsAb的含量越高,机体抵抗HBV感染的能力越强,且持续时间也越长。通过做定量检测,根据HBsAb浓度可判断机体对HBV的免疫状态及乙肝疫苗的免疫效果;若HBsAb的浓度较低,应该加强注射1针乙肝疫苗,使机体内HBsAb的浓度提高,从而起到保护作用。同时,接种乙肝疫苗后,机体所产生的免疫力可因个体差异而不同,有的人可产生高浓度的HBsAb并持续数十年;而有的人所产生的HBsAb浓度则不是很高,且持续时间也不长,数年后就逐渐消失,这部分人应及时关注机体内HBsAb的浓度变化,必要时也须加强注射1针乙肝疫苗(但也有人认为注射过乙肝疫苗后,尽管这部分人的HBsAb浓度并不高,但当机体受到HBV感染时,会产生记忆反应,迅速提高免疫力)。总而言之,定量检测乙肝疫苗免疫力对高危人群预防免疫具有重要意义,特别是在儿童及青少年预防乙肝方面。

  在慢性乙肝的治疗过程中,患者对自己病情的变化最为关切。定量检测乙肝两对半中各项血清学标志物的浓度可使病人能够对更清楚地了解自己的病情,提高治疗信心,同时也加强对医生的信任度,改善医患关系,提高治疗依从性,利于疾病治疗。




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